Epidemiological analysis of bovine tuberculosis in the southern region of Rio Grande do Sul from 2000 to 2015 / Análise epidemiológica da tuberculose bovina na região sul do Rio Grande do Sul no período de 2000 a 2015

Bovine tuberculosis (BTB) is an infectious and zoonotic disease with socioeconomic importance, responsible for economic losses in livestock due to the decrease in animal productivity, mortality, bovine carcass condemnation and restriction on exportations. The objective of the present study was to evaluate the epidemiological aspects of this disease through a descriptive analysis and time series of cases of bovine tuberculosis diagnosed at the Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) of the Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Pelotas (UFPel) from 2000 to 2015. A survey was carried out in the LRD database of cases diagnosed as tuberculosis in cattle during this period. The incidence rate of BTB ([cases/population] x 100000) was calculated. Qualitative variables (sex, age, race, origin, type of material and presumptive diagnosis) were analyzed in a descriptive way, aiming to establish the profile of affected animals, characterize the municipalities in which the disease is originated and also fix the main referral organs for diagnosis. The time series analysis was performed using the Gretl statistical software 1.9.12 (GNU Regression, Econometric and Time-series Library). To verify the existence of the stationary distribution, the test of Dickey-Fuller was used, considering a value of p<0.05. During this period, 331 cases of BTB were diagnosed in the LRD. The present study identified that the predominant profile of the bovines affected by tuberculosis was female bovine aged more than two years old and crossbreed; the main organ sent for histopathological examination was lymph nodes. The microregion of Pelotas presented the highest incidence of the disease. There was also a tendency of a decrease in the incidence rate of this disease over the years, absence of seasonal influence in the occurrence of the disease and no cases of epidemics occurred from 2002 to 2015 in the area covered by the LRD-UFPel.(AU)

Tuberculose bovina é uma enfermidade infectocontagiosa e zoonótica, de importância socioeconômica, responsável por prejuízos econômicos na pecuária em decorrência da diminuição na produtividade animal, mortalidades, condenações de carcaças e restrições nas exportações. O objetivo do presente estudo foi avaliar os aspectos epidemiológicos, por meio de uma análise descritiva e de séries temporais, dos casos de tuberculose bovina diagnosticados no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel), no período de 2000 a 2015. Foi realizado um levantamento no banco de dados do LRD dos casos diagnosticados como tuberculose em bovinos, entre os anos de 2000 e 2015. Foi calculada a taxa de incidência da tuberculose bovina ([casos/população] x 100000). As variáveis qualitativas (sexo, idade, raça, procedência, tipo de material e diagnóstico presuntivo) foram analisadas de forma descritiva, tendo como finalidade estabelecer o perfil dos animais acometidos, caracterizar os municípios de origem, e estabelecer os principais órgãos remetidos para diagnóstico. A análise de série temporal foi feita através do software estatístico Gretl 1.9.12 (GNU Regression, Econometricand Time-series Library) e para verificar a existência da estacionariedade utilizou-se o teste de Dickey-Fuller aumentado, considerando um valor de p<0,05. Durante este período foram diagnosticados 331 casos de tuberculose bovina no LRD. O presente estudo permitiu concluir que o perfil predominante dos bovinos acometidos por tuberculose foi de fêmeas, com mais de dois anos de idade e mestiças; o principal órgão encaminhado para exame histopatológico foram linfonodos e a microrregião de Pelotas apresentou a maior incidência da doença. Foi constatada, ainda, uma tendência de queda na taxa de incidência da doença ao longo dos anos analisados, ausência de influência sazonal na ocorrência da enfermidade e, não foram registrados casos de epidemias nos anos de 2002 a 2015, na área de abrangência do LRD-UFPel.(AU)

Bovine tuberculosis: diagnosis in dairy cattle through the association of analyzes / Tuberculose bovina: diagnóstico em bovinos leiteiros através da associação de análises

Tuberculosis is a chronic anthropozoonosis of worldwide occurrence, caused by the bacterium Mycobacterium tuberculosis and its variants. In Brazil, the National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis in cattle, is responsible for diagnosing and the correctly allocate positive animals, but there is still a lack of definitive diagnosis of the disease. This study described the use of five diagnostic tools that can be used, preferably together, for the confirmation of suspected cases. These tools included the clinical examination comparative cervical tuberculin test, macroscopic findings during the slaughtering and histopathology of the damaged tissues followed by histochemistry. We evaluated a total of 211 dairy cattle, where 15.1% (32/211) had classic clinical signs of bovine tuberculosis, 74 (35%) showed reactivity in the comparative cervical tuberculin test. Of the total number of animals, 141 (66.8%) were referred for sanitary slaughter due to legal and control issues in the outbreaks of the disease. In the follow-up of slaughtering and inspection of viscera and carcasses, 74 (52.5%) had macroscopic lesions compatible with bovine tuberculosis, while 67 (47.5%) showed no visible changes. During the inspection, fragments of lymph nodes and liver and lung parenchyma were collected from five cattle with macroscopic lesions and five with no lesions. The histopathological analysis showed numerous areas of caseous necrosis with or without central calcification and granulomatous inflammatory infiltrate. In the special staining of Ziehl-Neelsen, numerous acid-fast bacilli were evidenced in all cases.(AU)

A tuberculose é uma antropozoonose crônica de ocorrência mundial, causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis e suas variantes. No Brasil existe o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose em bovinos que viabiliza o diagnóstico e a destinação correta dos animais positivos, porém ainda há carência quanto ao diagnóstico da doença. Assim, este trabalho descreve a utilização de cinco ferramentas diagnósticas para a confirmação de casos suspeitos de tuberculose. As ferramentas utilizadas compreenderam o exame clínico, teste tuberculínico cervical comparativo, os achados macroscópicos durante o abate sanitário e a histopatologia dos tecidos lesados seguido de histoquímica. O estudo avaliou um total de 211 bovinos leiteiros, dos quais 15,1% (32/211) apresentaram sinais clínicos clássicos de tuberculose bovina, 35,1% (74/211) apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais (67,8%) foram encaminhados para abate sanitário devido a questões legais e de controle nos focos da doença. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária de vísceras e carcaças verificou-se que 51,8% (74/143) dos bovinos abatidos apresentavam lesões macroscópicas compatíveis com tuberculose bovina, enquanto 48,2% (69/143) não apresentavam alterações visíveis. Durante a inspeção foram coletados fragmentos de linfonodos e parênquima de fígado e pulmão de cinco bovinos com lesões macroscópicas e de cinco sem lesões, que na análise histopatológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa com ou sem calcificação central e infiltrado inflamatório granulomatoso. Na coloração de Ziehl-Neelsen foram evidenciados numerosos bacilos álcool-ácido resistentes em todos os casos. Assim, diante dos resultados obtidos verifica-se que as análises empregadas no presente estudo foram de extrema importância para o diagnóstico acurado de tuberculose em bovinos.(AU)

Tuberculose bovina: diagnóstico ante mortem e post mortem em bovinos leiteiros através da associação de análises / Bovine tuberculosis: diagnosis ante mortem and post mortem in dairy cattle through analysis association

Este estudo descreve o emprego de quatro métodos diagnósticos para a confirmação de casos de tuberculose em bovinos. Para tanto foram avaliados 211 bovinos leiteiros, dos quais 35,1% apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais foram encaminhados para abate sanitário. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária verificou-se que 51,8% dos bovinos apresentavam lesões visíveis compatíveis com tuberculose. Também foram coletados fragmentos teciduais de bovinos com e sem lesões macroscópicas, os quais na análise histológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa e áreas de calcificação, e na coloração de Ziehl-Neelsen apresentaram bacilos álcool-ácido resistentes. Assim, as análises empregadas no estudo se mostraram importantes para o diagnóstico acurado de tuberculose bovina, além de alertar para o risco de saúde pública que pessoas que trabalham nos abatedouros e/ou em contato direto com bovinos doentes estão submetidas.

Metabolites from endophytic Aspergillus fumigatus and their in vitro effect against the causal agent of tuberculosis / Metabolitos de Aspergillus fumigatus endofítico e seu efeito in vitro contra o agente causal da tuberculose

ABSTRACT Tuberculosis (TB) remains one of the most deadly communicable infectious diseases, causing 1.4 million deaths in 2015 worldwide due to many conditions, including the inadequate treatment and the emergence of multidrug-resistant strains of the causal agent, Mycobacterium tuberculosis. Therefore, drugs developed from natural sources, as microorganisms and plant extracts, are a frequent target for the research and discovery of antimicrobial compounds. The current study started the characterization of compounds produced by an Aspergillus fumigatus isolated from copaíba (Copaifera multijuga) that efficiently inhibits M. tuberculosis by releasing the compounds into the fermentation broth under specific culture conditions. A preliminary assay was carried out with a correlate species, M. smegmatis, aiming to detect an antimicrobial effect related to A. fumigatus fermentation broth. The direct use of this substrate in antibiosis assays againstM. tuberculosis H37Rv strain (ATCC 27294) allowed the detection of antimicrobial activity with a minimal inhibitory concentration of 256 μg mL-1, demonstrating that purification processes developed by the Biotage Flash Chromatography System are robust and reliable techniques for purification of compounds from natural sources. Also, this chromatographic system can be used in combination with specific biochemical tests, improving the search for reliable results. We conclude that this fraction can express a broad action range, inhibiting both Mycobacterium species used as target organisms.

RESUMO A tuberculose continua a ser uma das doenças infecciosas transmissíveis mais mortais, causando 1,4 milhão de mortes em 2015 em todo o mundo devido a vários fatores, incluindo o tratamento inadequado e o surgimento de cepas multirresistentes do agente causal, Mycobacterium tuberculosis. Portanto, as drogas desenvolvidas a partir de fontes naturais, como micro-organismos e extratos de plantas, são um alvo freqüente para a pesquisa e descoberta de compostos antimicrobianos. O presente estudo foi um ponto de partida para caracterizar compostos produzidos por um Aspergillus fumigatus isolado de copaíba (Copaifera multijuga) que inibe eficientemente M. tuberculosis, liberando os compostos no caldo de fermentação em condições de cultura específicas. Realizou-se um ensaio preliminar com uma espécie correlata, M. smegmatis, com o objetivo de detectar um efeito antimicrobiano relacionado ao caldo de fermentação de A. fumigatus. O uso direto deste substrato em ensaios de antibiose contra a estirpe H37Rv de M. tuberculosis (ATCC 27294) permitiu a detecção de atividade antimicrobiana com uma concentração inibitória mínima de 256 μg mL-1, demonstrando que os processos de purificação desenvolvidos pelo Biotage Flash Chromatography System são técnicas robustas e confiáveis para purificar compostos de fontes naturais. Além disso, este sistema cromatográfico pode ser usado em combinação com testes bioquímicos específicos, melhorando a busca de resultados confiáveis. Concluímos que esta fração pode expressar uma ampla gama de ação, inibindo ambas as espécies de Mycobacterium utilizadas como organismos-alvo.

Caracterização histológica e imuno-histoquímica das lesões de tuberculose em bovinos e de linfadenite granulomatosa em suínos / Histological and immunohistochemical characterization of tuberculosis lesions in cattle and of granulomatous lymphadenitis in swine

Mycobacterium sp. induz inflamação granuloma-tosa em diferentes espécies animais. Mycobacterium bovis e o complexo Mycobacterium avium são importantes patógenos de bovinos e suínos e podem causar infecção em humanos, principalmente imunossuprimidos. Perdas na produção, barreiras comerciais e prejuízos por condenação de carcaças em abatedouro/frigorífico estão atrelados à ocorrência dessas infecções, com prejuízos econômicos significativos. Foi realizado um estudo de casos diagnosticados como tuberculose em bovinos e linfadenite granulomatosa em suínos no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de janeiro de 2007 a dezembro de 2011. Dados referentes à raça, ao sexo, à idade e ao histórico clínico foram compilados dos livros de registro e analisados. As características histológicas das lesões em linfonodos e pulmões foram avaliadas em Hematoxilina-Eosina, com predomínio de células gigantes nas lesões de tuberculose bovina e de macrófagos epitelioides em suínos. As técnicas histoquímicas de Ziehl-Neelsen e Tricrômico de Masson foram utilizadas para evidenciar, respectivamente, bacilos álcool-ácido resistentes e tecido conjuntivo fibroso nas lesões. A técnica de imuno-histoquímica foi utilizada em aproximadamente 30% dos casos estudados de cada espécie, selecionados aleatoriamente, para a caracterização do infiltrado linfocítico. Foram utilizados os anticorpos anti-CD3 para a marcação de linfócitos T e anti-CD79cy para a marcação de linfócitos B. Linfócitos T predominaram nas lesões em ambas as espécies, com diferença estatisticamente significativa entre as médias dos linfócitos T e linfócitos B. Foi usado o teste t pareado, com t=5,501 (p<0,001) nas lesões dos bovinos e t=5,826 (p<0,001) para as lesões de linfadenite dos suínos...

Mycobacterium sp. induces granulomatous inflammation in different animal species. Mycobacterium bovis and the Mycobacterium avium complex are important cattle and swine pathogens that can also infect humans, especially those immunosuppressed. Losses in production, commercial barriers and carcasses condemnations in slaughtering are related to this infection, which implies in large economic losses. It was carried out a study on bovine tuberculosis lesions and granulomatous lymphadenitis in pigs, diagnosed by the Setor de Patologia Veterinária from the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brazil, between January 2007 and December 2011. Data concerning breed, sex, age and clinical history were retrieved from the files and analyzed. Histological features of the lesions in lymph nodes and lungs were evaluated in Hematoxylin-Eosin staining. Multinucleated giant cells were predominant in bovine tuberculosis lesions and epithelioid macrophages were abundant in swine. Ziehl-Neelsen and Masson's trichrome techniques were used respectively to demonstrate the alcohol-acid resistant bacillus and fibrous connective tissue in the lesions. The immunohistochemistry technique was performed to characterize the lymphocytic infiltrate. Anti-CD3 antibodies were utilized to immunolabeling lymphocytes T, and anti-CD79cy to lymphocytes B. Lymphocytes T were predominant in both species lesions, confirmed statistically by paired t test, which showed significantly differ means of T and B lymphocytes, with t=5,501 (p<0.001) for the bovines tuberculosis lesions, and t=5.826 (p<0.001), for the cases of pigs lymphadenitis...

Fungal isolation in HIV patients and CD4 count.

Aims: This study aimed to investigate fungal isolation in HIV infected patients and its relationship with CD4 count. Study Design: Cross-sectional study. Place and Duration of Study: This study was carried out in Nnamdi Azikiwe University Teaching Hospital, Nnewi, Anambra State, Nigeria (between March and July 2013). Methodology: A total of 100 positive Human Immunodeficiency Virus (HIV) patients (28 males, 72 females; age range 1-70 years) were included in this study. The sputum specimens were tested for mycobacteria using Ziehl Neelson’s staining technique. Fungal sputum culture was carried out using standard conventional fungal culture method. Identification was done using chromogenic media and standard staining methods. Results: There were significant fungal associations with gender, age and antiretroviral therapy (P≤0.05). Out of 100 sputum samples cultured, 80 had fungal growths; 61 single and19 mixed isolates, while the remaining 20 samples were without fungal growth. Different fungi species were isolated from 5 out of the 9 patients positive for Mycobacterium spp. A total of 8 different fungal species were isolated with Candida albicans, 24(30%), as the predominant species which had a CD4 count range of 10-200 cells/μl, while Aspergillus niveus was the least, 1(1.2%) with CD4 count range of 300-400 cells/μl. Penicillium marneiffei was the second most prevalent fungi, 11(13.8%). Patients with CD4 T-cell count of less than 100 cells/μl had the highest frequency of fungal isolates from sputum 27(76.4 %) (P≤0.05), while those with CD4 counts >400 cells/μl showed no fungal infection. Patients with Aspergillus fumigatus, Candida glabrata and mixed infections had a total white blood cell (WBC) count of <4.0x109 cells /1. Neutropenia was also observed in patients with Candida albicans, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger and Pencillium marneiffei. Conclusion: HIV infection increases the susceptibility to fungal colonization and infection. The CD4 counts of the patients have a strong relationship with the frequency and type of fungal isolates. The lower the CD4 count the higher the frequency of fungal isolates. Since invasive fungal colonization of the lungs remain important causes of death in immunocompromised patients, early isolation and identification of the colonizing fungi can improve the prognosis of patients.